7细胞COX-2表达,这可能是蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物发挥抗炎作用的信号传导机制之一。
目的探究褪黑素对脂多糖刺激后大鼠腹腔巨噬细胞产生的NO、ROS、p38及磷酸化p38的影响及其相关机制。方法使用CCK8试验检测褪黑素对大鼠腹腔巨噬细胞的药物毒性;使用酶标仪检测NO的表达;使用荧光显微镜检测ROS的表达;RT-PCR法检测mRNA水平总p38的表达量;Western blot法检测p38 MAPK通路中p38以及磷酸化p38的表达量。结果褪黑素对大鼠腹腔巨噬细胞无药物毒性。褪黑素及p38抑制剂(SB203580)均有效抑制了脂多糖刺激后大鼠腹腔巨噬细胞NO、ROS、以及磷酸化p38的表达,同时总p38的表达量并没有改变。结论褪黑素通过抑制p38 www.selleck.cn/screening/pi3k-signaling-inhibitor-library.html MAPK(mitogen-activated protein kinase)信号通路的激活进而减少脂多糖刺激后大鼠腹腔巨噬细胞的NO(P=0.000)和ROS(P=0.000)的产生。
目的观察大黄素对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)p38MAPK/CREB/PPARγ/CTGF蛋白表达的影响,以探讨大黄素抑制高糖培养的GMC增殖及纤维化的可能机制。方法

Western blot方法检测p-p38MAPK/p-CREB/PPARγ/CTGF蛋白表达情况。结果高糖能够诱导大鼠GMCp-p38MAPK/p-CREB/CTGF表达增加,抑制PPARγ蛋白表达,与正常对照组比较差异有统计学意义(P
目的研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对内皮细胞通透性的影响,以及HMGB1受体(RAGE)和p38 MAPK通路在此病理过程中的作用。方法 HMGB1(200 ng/m L)与人脐静脉内皮细胞株分别在体外共同培养0、3、6、12和24

h,以0 h为对照检测HMGB1诱导单层内皮细胞通透性Pd改变的时间效应;用电阻法分别在0、3、6、12和24 已经 h测量正常空白对照组(单纯培养基)和HMGB1组(200 ng/m L)的单层内皮细胞电阻值TER,比较两组间在相同时间点电阻值的差别;p38 MAPK抑制剂SB203580(25μmol/L)预先作用1 h,继以HMGB1(200 ng/m L)作用12h,比较不同组间细胞通透性的变化;以HMGB1(200 ng/m L)分别作用0、10、20、30、60 min后观察细胞内p38蛋白表达及磷酸化p38表达的时间效应;转染siRNA下调RAGE表达,或以原代培养野生型和RAGE(-/-)小鼠肺微血管内皮细胞培并继以HMGB1刺激,比较各组细胞内磷酸化p38蛋白表达的变化。通透性检测采用FITC荧光标记右旋糖酐漏出法及跨内皮电阻(TER)测定法,蛋白表达用免疫印迹法检测。结果 HMGB1以时间依赖的方式引起单层内皮细胞通透性Pd的升高,12 h与0 h相比,差异有统计学意义(P<0.05);SB203580预处理再以HMGB1刺激后细胞通透性明显降低,与HMGB1单纯刺激组相比,差异有统计学意义(P
目的研究补阳还五汤抗同型半胱氨酸(Hcy)诱导的脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的作用及其机制。方法采用Hcy造模,将内皮细胞随机分为10组,即空白组(10%空白血清),模型组(Hcy+10%空白血清),补阳还五汤低剂量组(5%含药血清+Hcy)、中剂量组(10%含药血清+Hcy)、高剂量组(20%含药血清+Hcy),10%FBS+Hcy对照组,Rho激酶(ROCK)阻断剂Y27632+Hcy组,靶分子肌球蛋白轻链激酶(MLCK)阻断剂ML-7+Hcy组,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580+Hcy组,细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂PD98059+Hcy组,24

h后,用IP裂解液(含PMSF)裂解细胞。用蛋白质印迹法(Western blot)测定ROCK、MLCK蛋白水平,用RT-PCR技术测定ROCK、MLCK m RNA的表达情况,并用激光共聚焦测定细胞骨架结构蛋白纤维肌动蛋白(F-actin)的变化。结果 Western blot与RT-PCR结果显示:模型组与空白组比较,HUVEC细胞ROCK、MLCK蛋白以及其m RNA水平明显上升,而补阳还五汤含药血清组和抑制剂组对其有明显的下调作用。激光共聚焦检测骨架蛋白F-actin实验中,与空白组比较,模型组细胞应力纤维明显增多;而补阳还五汤各剂量组相对于模型组,应力纤维的形成明显降低。结论补阳还五汤可能通过调节内皮细胞Rho/Rho激酶信号通路,阻止细胞骨架的改变,减轻内皮细胞损伤而发挥其抗动脉粥样硬化的作用。
目的:探讨党参炔苷对雌性大鼠卵巢颗粒细胞(GCs)增殖分化的影响及其作用机制。方法:观察大鼠卵巢GCs的生长状况,通过CCK-8实验和细胞雌二醇(E2)分泌量测定确定细胞体外培养时间以及最佳给药浓度,进一步观察党参炔苷对体外培养的卵巢GCs增殖分化及分泌功能的影响,并通过阻断GCs中的c 寻找更多 AMP信号通路、ERK 1/2信号通路、p38MAPK信号通路和钙离子(Ca2+)通道来探究其对卵巢GCs功能影响的作用机制。结果:确定24 h为GCs最佳共培养时间;党参炔苷浓度为3.125 mg/L时,能显著增加E2的分泌量(P0.05)。c AMP通路抑制剂H89和p38MAPK通路抑制剂SB203580能够抑制党参炔苷对卵巢GCs分泌E2的促进作用(P
目的探讨积雪草苷对阿霉素诱导的足细胞中的细胞骨架及p38通路的影响。方法用1μmol/L阿霉素制造足细胞损伤模型,检测荧光显微镜观察足细胞骨架蛋白,Western blotting检测足细胞p38信号通路的磷酸化水平。结果与模型对照组相比,积雪草苷预孵育后足细胞骨架的结构得以很好的保存。p38抑制剂SB203580拮抗阿霉素对足细胞的损伤,足细胞骨架结构较好。阿霉素(1μmol/L)显著升高p38的磷酸化水平,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),提示阿霉素可诱导p38通路的活化。积雪草苷预处理细胞后,能够有效地遏制阿霉素诱导的p38通路活化,使p38的磷酸化水平显著降低,与模型对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。p38抑制剂SB203580能拮抗阿霉素诱导的足细胞p38磷酸化,与模型对照组比较差异有统计学意义(P<0.