7细胞系中,CADPE在早期抑制RANKL诱导的破骨细胞分化但是对M-CSF诱导的骨髓巨噬细胞细胞增殖和分化没有抑制作用。在分子水平上,CADPE抑制RANKL诱导的丝裂原活化蛋白激酶信号通路中ERK1/2, p38和JNK的蛋白磷酸化而对于NF-κB信号通路中IκBα的降解和p65的磷酸化没有影响。另外,CADPE抑制RANKL诱导的AP-1/c-Fos的入核和活性,并且过表达c-Fos阻止了CADPE对于破骨细胞形成的抑制作用。CADPE还能够抑制RANKL诱导的钙离子的振荡,降低破骨细胞形成相关基因的表达,包括NFATcl,

TRAP, cathepsin K和c-Src。为了检测CADPE对于破骨细胞活性在体内的效果,我们还检测了在卵巢切除诱导的骨质疏松模型中CADPE的效果,实验结果表明CADPE可以抑制卵巢切除导致的骨缺失。总之,我们的数据表明CADPE可通过抑制MAPKs和Ca2+-NFATc1信号通路来抑制RANKL诱导的破骨细胞形成和骨缺失。因此,CADPE成为治疗骨质疏松等破骨细胞相关疾病的新的候选药物。
乳铁蛋白是一种具有抗菌、抗病毒、免疫调节等多功能性铁结合糖蛋白，它广泛存在于哺乳动物乳汁中，一些外分泌物如泪液、滑液、唾液等也含有少量乳铁蛋白。近年来发现乳铁蛋白对骨生长和代谢的作用逐渐成为研究热点。本研究从新鲜牛乳中分离纯化得到乳铁蛋白，研究乳铁蛋白对成骨细胞增殖作用影响，考察乳铁蛋白对成骨细胞MAPK信号转导通路影响，同时研究不同加热处理参数对乳铁蛋白成骨活性影响及对成骨细胞MAPK信号转导通路影响，进而为乳铁蛋白在工业化生产中的应用工艺开发奠定一定的理论基础。 可能 本研究以新鲜牛乳为原料，通过脱脂、除酪蛋白、SP Sepharose Big Bead离子交换层析、Superdex200凝胶层析、超滤除盐浓缩及真空冷冻干燥等一系列过程，最终获得乳铁蛋白纯品。在纯化过程中对Superdex200层析条件进行优化，通过优化条件来分离纯化乳铁蛋白，得到乳铁蛋白分子量约为76kDa，乳铁蛋白纯度约为93.82%，得率为68.19%。通过差示扫描量热法测定得到的乳铁蛋白热变性温度为70.4℃和88.2℃。综合考虑乳铁蛋白热变性温度及实际生产加工中乳的热处理参数，设置以下加热参数：62-65℃加热处理30min、72℃加热处理10s、85℃加热处理10min、95℃加热处理10min对乳铁蛋白进行热处理，进而考察热处理对乳铁蛋白活性的影响。

从新生SD乳鼠中提取成骨细胞，通过形态观察、HE染色、碱性磷酸酶染色及矿化结节染色来鉴定成骨细胞。运用MTT法进行细胞增殖实验，比较不同加热处理乳铁蛋白对成骨细胞增殖影响。研究结果表明未加热乳铁蛋白能显著促进成骨细胞增殖，且在生理浓度（1-100μg/mL）范围内呈剂量依赖关系。与未加热乳铁蛋白对成骨细胞增殖作用相比，62-65℃加热处理低浓度乳铁蛋白（1、10、50μg/mL）对成骨细增殖作用无显著变化，而处理高浓度乳铁蛋白（1000、1250、1500μg/mL）则会显著降低对成骨细胞增殖作用；72℃加热处理乳铁蛋白对成骨细胞作用，作用24h时，低浓度（1、10μg/mL）对成骨细胞增殖作用显著提高，作用48、72h时则无显著变化，72℃加热处理高浓度乳铁蛋白（1000、1250、1500μg/mL），作用24h、48h会显著降低对成骨细胞增殖作用，作用72h则无显著作用；85℃加热处理和95℃加热处理浓度高于50μg/mL乳铁蛋白都会显著降低对成骨细胞增殖作用。 PLX3397体外 研究乳铁蛋白对成骨细胞MAPK信号通路影响发现：乳铁蛋白可通过介导ERK1/2、p38MAPK、JNK亚通路来促进成骨细胞增殖，通过介导ERK1/2提高ALP活性。不同加热处理乳铁蛋白则通过介导ERK1/2、p38MAPK、JNK亚通路抑制成骨细胞增殖和ALP活性。
目的: Fasudil 研究柚皮苷(Naringin)对人卵巢癌SKOV3细胞P38丝裂原活化蛋白激酶(P38mitogen activated protein kinases,P38MAPK)蛋白与细胞外信号调节激酶1/2(extra cellular signalregulated protein kinase,ERKl/2)蛋白表达的影响，初步探讨柚皮苷的抗肿瘤作用。 方法: 体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,分为空白对照组、柚皮苷10μmol/L组、20μmol/L组、40μmol/L组、塞来昔布80μmol/L组。采用MTT比色法在48h测定不同浓度的柚皮苷对SKOV3细胞的抑制率，运用WesternBlot法测定培养48h后各组细胞中P38MAPK及ERK1/2蛋白表达水平。

结果: 1.MTT检测法显示，柚皮苷对卵巢癌SKOV3细胞生长具有明显的抑制作用。 2.WesternBlot法结果显示，与空白对照组相比，低浓度柚皮苷组（10μmol/L、20μmol/L）对SKOV3细胞P38MAPK蛋白表达的无明显影响，而40μmol/L柚皮苷及塞来昔布组可明显下调P38MAPK蛋白表达,具有统计学意义（P
目的:探讨姜黄素对DSS诱导的小鼠急性期UC的肿瘤坏死因子（TNF）-α、髓过氧化物酶（MPO）影响及其对UC治疗作用，同时检测结肠黏膜磷酸化p38MAPK及p38MAPK mRNA的表达，探讨p38MAPK信号通路在溃疡性结肠炎疾病中的机制，以及姜黄素对小鼠UC模型中p38MAPK通路的影响。方法：将健康60只雌性BALB/c小鼠，鼠龄6-7wk，体重16-20g，按随机数字表分为6组：正常组（A组）、模型组（B组）、地塞米松干预组（C组：1.5mg/kg.d）、姜黄素低剂量干预组（D组:姜黄素15mg/kg.d）、姜黄素中剂量干预组（E组：姜黄素30mg/kg.d）、姜黄素高剂量干预组（F组：姜黄素60mg/kg.d），每组10只。正常组自由饮水，其余各实验组小鼠均给予5％DSS溶液连续7d自由饮用，并在造模第一天同时开始腹腔注射给药，姜黄素低、中、高剂量干预组分别按上述剂量给药，正常组注射等体积生理盐水，模型组注射等体积的2.