(4)使用了FasL小分子干扰RNA(siRNA)抑制FasL蛋白表达。免疫印迹法检测FasL siRNA对FasL蛋白表达的抑制

(4)使用了FasL小分子干扰RNA(siRNA)抑制FasL蛋白表达。免疫印迹法检测FasL siRNA对FasL蛋白表达的抑制情况。流式细胞仪检测使用FasL siRNA后对5-FU、LY294002、5-FU联合LY294002诱导细胞凋亡的影响。 (5)采用培养细胞皮下接种法建立裸鼠异位CAL-101体内移植瘤模型,观察无任何处理、25mg/kg LY294002、40mg/kg 5-FU、25mg/kg LY294002联合40mg/kg 5-FU对肿瘤生长的抑制。TUNEL法检测不同处理下肿瘤细胞的凋亡情况。用免疫组化法检测p-AKT-Ser473、p-FKHR-Sselleck激酶抑制剂er24、p-FKHRL1-Thr253、FasL活化的caspase-8(active-caspase-8)、短链c-FLIP(c-FLIPs)、t-Bid、active-caspase-3表达。 (6)建立裸鼠胃癌原位移植模型,观察无任何处理、25mg/kg LY2寻找更多94002、40mg/kg 5-FU.25mg/kg LY294002联合40mg/kg 5-FU对肿瘤转移的不同影响。用免疫组化法检测NFκB-p65、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2、MT1-MMP、MT2-MMP表达。 结果 (1)两种细胞分别以不同浓度的5-FU(0、1、5、10μM)联合20μMLY294002处理24小时。

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