结论circGLIS2在体内可抑制胃癌细胞成瘤,并可上调MLKL的表达,与体外实验结果相符。
研究目的胃癌(Gastric Cancer,GC)是常见消化系统肿瘤之一,虽己证实幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori,Hp)的持续感染是其发生发展的重要因素,但胃癌发生发展过程涉及到多种因素,且Quizartinib molecular weight存在个体遗传差异。深化探索胃癌的潜在发病机制,并寻找新型诊断标志物与潜在治疗靶点对控制胃癌的发生及进展至关重要。环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种不具有3′端、5′端及polyA尾的单链闭合环状非编码RNA。circRNA的封闭式环状结构导致其不易被核酸外切无酶分解,因此比线性RNA更稳定。circRNA在不同物种中具有进化保守性,并且通常在不同组织及不同发育阶段具有表达特异性。多个circRNA已被证实在肿瘤的发生发展过程中起关键作用,可作为新型肿瘤标志物。circRNA功能丰富,可与RNA结合蛋白相互作用,作为miRNA海绵调节靶基因寻找更多表达,参与基因的转录后调节,部分circRNA具有翻译功能。虽然已有’些研究探讨circRNA对胃癌的作用,但是多数停留在表达水平,对其作用机制仍未明确。本研究首先选用circRNA芯片进行胃癌组织与癌旁组织表达谱分析,寻找差异表达的circRNA,并探究其在胃癌中的作用及机制,拟发掘胃癌的潜在标志物,探索胃癌发生发展的分子机制以期为胃癌的分子靶向治疗提供新方向。

2.滨蒿内酯可能参与的与肿瘤相关的信号通路分别为MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路、pathways in cancer、TNF信号通路,共涉及34个靶点,其中2个靶点IKBKB、Akt1同时参与4条通路,9个靶点FLT4、EGFR、IGF1R、MET、PDGFRB、ERBB2、MAPK8、MAPK10及RPS6KA5参与了3条通路。3.通过Cytoscape软件可视化蛋白-蛋YH25448白互作网络,Degree排名前5的靶点分别为Akt1、SRC、HSP90AA1、MAPK8、EGFR、PTGS2(其中EGFR与PTGS2并列第5),与信号通路相关的靶点取交集,滨蒿内酯治疗胰腺癌的候选关键基因最可能为Akt1,其次为MAPK8和EGFR。4.Akt1及MAPK8在胰腺癌组织和正常胰腺组织之间具有表达差异,且差异有统计学意义,而EGFR无统计学selleckchem的表达差异,推测滨蒿内酯抗胰腺癌的作用最可能是通过抑制Akt1的表达而实现的,其次是MAPK8。5.滨蒿内酯在Capan-2及SW1990细胞中IC_(50)值分别为225.2μM及209.1μM;经100、200、400μM滨蒿内酯处理细胞,与Control组对比,滨蒿内酯明显抑制胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭,诱导细胞周期停滞及凋亡,具有剂量依赖性,统计学差异Selleckchem Epacadostat明显。6.滨蒿内酯100、200、400μM与Control组对比,转移相关蛋白MMP9及抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax及cleaved caspase-3表达上调,具有统计学意义。7.通过qRT-PCR实验证实滨蒿内酯抑制Akt1表达,但不抑制MAPK8表达,滨蒿内酯最可能通过Akt1起到抗肿瘤的作用。8.滨蒿内酯100、200、400μM与Control组对比,不降低总PI3K及总Akt的表达,但显著抑制p-Akt的表达。

本研究是以HepG2细胞为模型,根据药物作用机制从多种药物中筛选6种代表性的药物紫杉醇、鬼臼毒素、顺铂、5-氟尿嘧啶及常用于肝损伤模型建立的CCl_4饱和溶液和药物的分散乳化剂的表面活性剂SDS为研究对象,用MTT测其IC_(50)值,并以IC_(50)值为参考(CCl_4其100%饱和溶液为参考),取其100%、75%、50%、25%、10%的5个浓度梯度作用细胞1h10058-F4、2h、4h、24h,然后采用HCS结合荧光标记技术检测药物直接作用细胞引起的相关指标的变化(如细胞数量、DNA含量、钙稳态、ROS、线粒体膜电位、细胞膜通透性等),并综合分析各个指标建立分析方法,结果表明紫杉醇、顺铂、5-氟尿嘧啶、SDS对HepG2细胞的的肝细胞毒性为细胞膜的完整性受损导致的;鬼臼毒素则是由于钙离子浓度升高导致钙稳态失衡引起4SC-202供应商的;CCl_4细胞毒性则是由ROS引起,并建立HCS检测早期药物肝毒性的方法。本研究根据紫杉醇和鬼臼毒素抗肿瘤的作用机制,从与其机制相同的多种药物筛选出两种药物分别为秋水仙碱和依托泊苷,采用同样HCS方法检测药物直接作用细胞引起的相关指标的变化,并对已建立的HCS分析方法进行验证。结果显示秋水仙碱表现出与紫杉醇相同毒性作用,依托泊苷同样也表现出selleck激酶抑制剂相同的毒性作用,表明HCS检测药物早期肝毒性的方法可行性。本研究利用已经建立的HCS检测早期肝毒性的方法对中药的早期肝毒性进行研究,从具有肝毒性中药中选出两种不同成分中药单体分别为薯蓣皂苷和泽泻醇B,通过HCS检测其早期肝毒性结果显示泽泻醇B和薯蓣皂苷对HepG2细胞毒性为氧化应激导致的,并推测氧化应激与铁凋亡有关。本实验研究是以炮制后熟三七中的人参总皂苷和人参皂苷单体为研究对象,测其细胞毒性,研究炮制时间对细胞毒性的影响。