2 MTT方法用于检测tivozanib在不同细胞株中的毒性,以及tivozanib对于耐药细胞株耐药倍数的影响。 3 Weste

2.MTT方法用于检测tivozanib在不同细胞株中的毒性,以及tivozanib对于耐药细胞株耐药倍数的影响。 3.Western Blotting用于检测细胞中ABCB1、ABCG2分子的表达,分析tivozanib对于ABC跨膜蛋白表达的影响。 4.Accumulation assay用于检测放射元素标记的ABC也许B1作用底物[3H]-paclitacel和ABCG2作用底物[3H]-mitoxantrone在细胞内的积累情况。 5.Efflux assay用于检测细胞在不同时间点对于ABCB1作用底物[3H]-paclitaxel和ABCG2作用底物[3H]-mitoxantrone的外泵作用。 6.[也许125I]Iodoarylazidoprazosin(IAAP)-photoaffinity labeling探讨tivozanib与ABCB1和ABCG2的作用位点。 7.ATPase assay用于测定tivozanib对于ABCB1和ABCG2的ATP酶活性的影响。 研究结果 1.Tivo更多zanib在浓度小于6μM时对于实验中所涉及的细胞株无明显细胞毒性。 2.Tivozanib在2.5μM和5μM的浓度时能够逆转ABCB1和ABCG2介导的多药耐药。MTT结果显示tivozanib在特定浓度能够显著降低耐药细胞株对于ABCB1转运底物紫杉醇、秋水仙碱和长春新碱的耐药性,以及ABCG2过表达细胞株对于ABCG2转运底物底物米托蒽醌、SN-38和多柔比星的耐药性。

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