01、P<0.01、P<0.01、P
目的：观察针刺督脉大椎、百会、人中(穴)对大鼠缺血区脑组织抗损伤与保护作用。观察缺血时脑组织TNF-α和Caspase-3表达的影响,探讨针剌督脉大椎、百会、人中(穴)对脑组织产生的保护作用及产生这种保护作用的可能机制。 方法：SD雄性大鼠32只随机分为模型组、假手术组、对照点组和针刺组四组,每组各8只。建立MCAO大鼠模型,等MCAO大鼠模型生命体征稳定后,采用ZeaLonga评分法神经功能缺损评分以验证模型成功与否,造模成功者六次治疗后再行神经功能缺损评分,采用HE染色观察大鼠脑组织的病理变化、原味末端标记法(TUNEL)法检测神经细胞凋亡,并应用SP免疫组织化学方法检测大鼠脑缺血区大脑组织中的TNF-α和caspase-3的表达。
结果：1.神经功能评分：①与假手术组比较,模型组、对照点组、穴位组神经功能缺损评分明显增高,差异具有非常显著性意义(P<0.01)；②与模型组比较,对照组及穴位组神经功能缺损评分降低,穴位组差异有非常显著性意义(P<0.01),对照点组比较差异有显著性意义(P<0.05)；③与对照点组比较,穴位组神经功能缺损评分明显降低,差异有显著性意义(P<0.01)；②与模型组比较,对照点组穴位组TNF-α阳性细胞数降低,差异有显著性意义(P<0.05),穴位组TNF-α阳性细胞数降低,差异有非常显著性意义(P<0.01)；③与对照点组比较,穴位组TNF-α阳性细胞数降低,差异有显著性意义(P<0.01)；②与模型组比较,穴位组的Caspase-3阳性细胞数降低,差异有非常显著性意义(P0.05)；③与对照点组比较,穴位组Caspase-3阳性细胞数明显降低,差异有非常显著性意义(P
目的：采用抗体蛋白芯片技术观察针刺督脉经(穴)对缺血损伤脑组织修复过程中相关信号蛋白磷酸化的变化,找出与上述过程关系最为密切的信号分子及通路,采用免疫印迹(Western-Blotting)法对该通路中关键蛋白的磷酸化水平进行检测,探讨针刺督脉经(穴)对脑组织缺血性损伤可能的修复机制。
JNK-IN-8订单 方法：32只SD大鼠随机抽取8只作为假手术组,其他24只采用线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠模型后,随机分为3组,即模型组、针刺对照点组、针刺穴位组,8只／组。本研究分为三个部分,第一部分：6次治疗后先行神经功能缺损评分再处死,对大鼠部分脑组织采用HE染色行脑组织细胞形态学观察。第二部分：提取缺血脑组织细胞,采用720磷酸化抗体蛋白芯片技术检测针刺治疗后的脑组织损伤修复相关信号蛋白磷酸化的变化,筛选出各组差异性表达的蛋白。第三部分：应用Western-Blotting方法检测大鼠缺血脑组织细胞磷酸化的丝裂原活化的蛋白激酶激酶的激酶(MAPKKK即Raf)蛋白(p-Rafl)和磷酸化细胞外信号调节激酶(extracellular ERK inhibitor查找购买 signal-regulated kinase, ERK)蛋白(p-ERK)的表达。 结果： 1.针刺穴位可明显降低MCAO大鼠神经功能缺损评分、改善缺血损伤脑组织形态：模型组、针刺对照点组、针刺穴位组神经功能缺损评分明显高于假手术组(P<0.01),且三组的神经细胞及脑组织结构较假手术组均有不同程度的结构破坏、变性坏死；针刺对照点组神经功能缺损评分低于模型组(P<0.05),且神经细胞的结构破坏、脑组织的变性坏死较模型组减少；而针刺穴位评分明显低于模型组(P<0.01)且低于针刺对照点组(P0.05)；与模型组比较：针刺对照点组的p-Rafl含量增高,而针刺穴位组的p-Rafl含量降低,均无统计学差异(P>0.05)；与针刺对照点组比较：针刺穴位组的p-Rafl含量降低,且低于假手术组和模型组,但无统计学差异(P>0.05)。
selleck化学药品 4.与假手术组比较：模型组和针刺对照点组的p-ERK含量有升高的趋势,针刺穴位组p-ERK含量有降低的趋势,但均无统计学差异(P>0.05)；与模型组比较：针刺对照点组和针刺穴位组的p-ERK都低于模型组,均无统计学差异(P>0.05)；与针刺对照点组比较：针刺穴位组的p-ERK含量低于针刺对照点组,且低于假手术组和模型组,但无统计学差异(P>0.05)。 结论： 1.针刺大椎、百会、人中(穴)能明显改善MCAO大鼠的神经功能缺损和缺血损伤脑组织形态。提示针刺大椎、百会、人中(穴)对缺血损伤脑组织具有一定的保护作用。 2.针刺大椎、百会、人中(穴)可调整造模后失调的与凋亡有关蛋白的磷酸化水平,此外,还可调整多个其它功能种类的蛋白,且涉及到的信号转导通路归属于细胞周期信号转导通路、MAPKS信号途径、细胞凋亡信号途径、黏附分子信号途径、非受体酪氨酸激酶信号途径、受体酪氨酸激酶信号途径等多条信号转导通路。提示多靶点、多条信号转导通路的激活是针刺大椎、百会、人中(穴)促缺血损伤脑组织修复的重要特征。 3.各通路中只有MAPKS信号传导途径中的关键蛋白被激活,提示MAPKS信号转导通路与针刺大椎、百会、人中(穴)对缺血损伤脑组织修复密切相关。 4.