由于Hh N是主要执行信号功能的蛋白,因此目前研究较多,主要包括Hh N蛋白的脂修饰,氨基端保守区域的功能研究,蛋白质结构分析以及多聚体和蛋白分泌的研究。我们注意到,大家对于Hh N蛋白羧基端的关注比较少。而该区域靠近Hh蛋白自裂解和胆固醇修饰的位点,在不同物种中具有高度的保守性。这提示我们,Hh N蛋白高度保守的羧基端有可而且能具有重要的生物学功能。为了了解Ihh N蛋白羧基端保守区域的作用,我们首先构建了Ihh N蛋白羧基端区域不同截断体的表达载体,当删除该区域SAAAKT六个氨基酸时,N端蛋白的稳定性受到影响;删除十个氨基酸(KSEHSAAAKT)时,蛋白不能发生自裂解。在此基础上,我们进一步构建了这一区域的不同点突点击此处变载体,蛋白表达实验发现该区域T200氨基酸突变后Ihh N蛋白的稳定性降低。更重要的是,我们发现由K191,S192,E193和H194四个氨基酸共同组成的结构域对于蛋白的自裂解有重要影响。接下来,我们在Shh蛋白羧基端与Ihh蛋白KSEH相同位置进行了同样的截断体试验,结果也发现这个结构域影响了也许Shh蛋白的自裂解反应。这表明Hh蛋白羧基端的这一区域的功能是高度保守的。以上这些新发现将为进一步深入阐释Hh蛋白自裂解机制提供重要依据。此外,在对Ihh N蛋白晶体结构进行分析时发现,一个Hh N蛋白的羧基端至少有三个氨基酸S195,A196和A197插入了相邻的Hh N蛋白分子的内部,提示我们这三个氨基酸或者以这三个氨基酸为主的某个结构域可能对Ihh蛋白多聚体形成有重要作用。