方法(1)采用SD雌性大鼠右胫骨内接种SHZ-88乳腺癌细胞法建立大鼠BCP模型;在各观察时间点采用电子von Frey测痛仪和BME-410C型全自动热痛刺激仪检测各组大鼠热痛阈值和机械痛阈值;免疫组化点击此处技术检测vlPAG中P2X_7受体阳性细胞数的变化;免疫印迹技术检测vlPAG中P2X_7蛋白水平变化;(2)免疫荧光双标法检测vlPAG中嘌呤P2X_7受体与NeuN、GFAPAntidiabetic Compound Library共表达情况;明确BCP大鼠P2X_7受体在vlPAG表达的部位;(3)BCP大鼠vlPAG置管后应用微透析技术联合ELISA方法,检测BCP大鼠vlPAG中神经递质D-serinwww.selleck.cn/products/carfilzomib-pr-171.htmle水平变化;(4)BCP大鼠给予腹腔注射不同剂量曲马多,观察曲马多治疗前后BCP大鼠热痛阈值、机械痛阈值以及vlPAG中P2X_7受体表达变化;(5)观察BCP大鼠vlPAG中预先微量注射P2X_7受体拮抗剂A-740003对腹腔注射曲马多镇痛效果的影响。