方法:扩增不同长度的SFRP5启动子区片段,构建到萤光素酶报告基因载体pGL3-Basic上,并将构建好的重组质粒转染入正常肝细胞系LO2细胞,再分别感染编码HBx的腺病毒(Ad-HBx)或编码绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-GFP),荧光显微镜下观察病毒感染效率,检测萤光素酶活性以观察HBx对SFRP5启动子活性的影响。结果:(1)含不同长度的SFRP5启动子区截短无突变报告质粒构建成功。(2)截短突变报告质粒的萤光素酶活性与pGL3-Basic对照组相比,分别为(6.32±0.04)倍(-478 bp～+47 bp)、(5.79±0.32)倍(-811 bp～+47 bp)、(3.59±0.34)倍(-1 235 bp～+47 bp)、(3.86±0.39)倍(-1 677 bp～+47 bp)、(Metformin购买3.26±0.42)倍(-2 072 bp～+47 bp)(均P<0.05)。过表达HBx可以明显抑制SFRP5启动子活性,抑制率分别为44%(-478 bp～+47 bp)(P<0.05)、46%(-811 bp～+47 bp)(P<0.05)、28%(-1 235 bp～+47 bp)、24%(-1 677 bp～+47 bp)和40GW572016%(-2 072 bp～+47 bp)。结论:HBx可以明显抑制SFRP5启动子区活性,可能导致SFRP5基因表达下调。”
“目的通过对胃肠道间质瘤(GIST)中PI3K、Akt和PTEN的蛋白表达变化的检测,探讨其表达与GIST临床病理特征及预后的相关性,并探讨它们间的相互关系。方法选择临床病理资料完整、随访结果确切的中国医科大学附属盛京医院1990年～2007年2月手术切除、病理证实的GIST新鲜组织标本124例。