已证实,bhlh转录因子的异常表达与多种肿瘤发生相关。前期实验结果已证实,sohlh2是一个新的抑癌基因,可抑制乳腺癌和结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。预实验结果显示,结肠癌干细胞中sohlh2表达明显下调,提示sohlh2可能参与结肠癌干细胞增殖分化的调控。本研究中,我们将探讨sohlh2在结肠癌干细胞扩增中的作用和作用机制。Wnt/β-catenin信号通路调控细胞增殖和selleck合成干细胞的自我更新,其异常激活在结肠癌发生发展中起着十分重要的作用。β-catenin是Wnt信号通路的关键分子,它可入核与TCF/LEF转录因子结合,促进其下游靶基因c-myc、cyclinD1表达,有助于结肠癌的生长以及CSCs的维持。β-catenin表达增加提示结肠癌患者预后不良,干扰β-catenin表达可抑制结肠癌的进展。长链非编码RNSelleckA(Long non-coding RNA,LncRNA)在肿瘤侵袭和转移过程中发挥关键性的调控作用。LncRNA-H19是最早报道的LncRNA之一,在多种肿瘤中高表达,可作为竞争性内源RNA结合miR-141,上调β-catenin的表达,激活β-catenin下游信号通路,促进结肠癌细胞的侵袭和转移。实验室前期研究证实sohlh2在结肠癌中Selleck VX 680抑制Wnt/β-catenin信号通路,LncRNA高通量测序结果显示,过表达sohlh2可下调LncRNA-H19的表达。因此,我们提出科学假设,sohlh2可能通过下调LncRNA-H19转录,抑制Wnt/β-catenin信号通路,参与结肠癌干细胞扩增的调控。研究方法1.结肠癌干细胞的分离培养与鉴定在低粘附性培养皿中,无血清培养人和小鼠结肠癌细胞HCT116和CT26。培养5-7天后,收集细胞球,进行传代、冻存、复苏。