为拓展研究的深度,考虑到增殖对胰腺癌的重要作用,我们以DNA复制相关蛋白MCM7为切入点,探讨其表达特征、预后相关性及生物学功能。为分析建立一个跨不同转录平台检测技术和患者队列的胰腺癌预后模型。经严格原始数据质量控制筛选,纳入了七个芯片数据集和两个RNA-seq数据集,一共348例正常胰腺组织和404例胰腺癌样本,以识别胰腺癌中一致性异常表达的基因谱。采用加权基因共表达网哪里络分析,探讨基因表达模式与临床特征之间的关系;进一步经LASSO算法和Cox回归构建预后模型,并通过时间依赖性生存风险曲线下面积,来检验模型的预测能力。另一方面,为探讨MCM7表达的临床特征相关性及其在胰腺导管腺癌中的功能。首先在58例覆盖正常胰腺组织、慢性胰腺炎、癌旁组织、胰腺导管腺癌原位癌、其淋巴结、肝脏等转移灶的病例中,用免疫组化评估MCMGSK2879552价格7的表达特征。进一步在57对胰腺导管腺癌及其癌旁对照组织中,分析MCM7表达和各临床病理特征的相关性。在验证MCM7在正常导管上皮细胞HPDE和六种胰腺导管腺癌细胞系中的内源性表达后,分别用siRNA瞬时转染和shRNA稳转细胞系两种策略,在至少两种胰腺癌细胞中,采用alamarBluecellviability评估细胞增殖、PI染色检测细胞周期LDC000067核磁状态;Annexin V/PI法测定细胞凋亡状态。除了对增殖的作用外,我们还检测了多个DNA损伤标志物的变化,及其对吉西他滨敏感性的影响。分析结果发现,差异表达基因多与肿瘤免疫微环境相关;相比于其他临床特征,胰腺癌转录组表达谱,有预测病人总生存期的潜力及相关性,最终四个基因的表达水平(DSG3,ARNTL2,NUSAP1,KRT7)被确定为独立的预后因子。我们提出的预后风险评分,在测试队列、自我验证队列中,显示出较好的准确性。