二亚硝基哌嗪诱发力竭游泳大鼠鼻咽上皮细胞癌变(“气虚染毒”)的细胞凋亡信号传导通路特征 随DNP诱导时间的延长,大鼠鼻咽上皮细胞病理变化日趋明显,最终发生恶变。在同一实验时段,模型组Ⅱ鼻咽上皮细胞病变发生率明显高于模型组Ⅰ,只是在同一病理阶段,所检测的基因表达活性在两组间的差异无统计学意义。 在正常鼻咽上皮细胞和单纯性增生病理阶段,二者之间的细胞凋亡活性和PCNA蛋白表达活性差异均无统计学意义(P>0.05)。随着鼻咽上皮细胞癌变过程的进展,异型增生组织和癌变组织中的细胞凋亡活性降低；虽然该二阶段的细胞凋亡活性差异无统计学意义(P>0.05),但分别与之前的两个阶段比较,其差异都具有统计学意义(P<0.05)；分别与之前的两个病理阶段比较,指标值差异也分别具有统计学意义(P0.05)。随着鼻咽上皮细胞病理变化的进展,异型增生组织和癌变组织中的Bcl-2蛋白表达活性增强,分别与之前的两个病理阶段比较,其差异均具有统计学意义(P0.05)。异型增生组织和癌变组织中的Cytochrome-C与Caspase-3蛋白表达活性减弱,分别与此前的两个病理阶段比较,其差异均具有统计学意义(P0.05)。随着鼻咽上皮细胞诱发性癌变进程的发展,Bax蛋白的活性表达程度呈现逐步降低趋势,但各病理阶段间的比较结果显示,其差异均无统计学意义(P>0.05)。进一步的相关分析提示,在此病理进程中,Bax蛋白活性与Bcl-2.Cytochrome-C和Caspase-3表达活性亦无明显的相关性关系(r分别为-0.157,0.196,0.334；P分别为0.593,0.501,0.243),但Bcl-2与Cytochrome-C和Caspase-3的表达活性之间则呈现明显的负相关(r分别为-0.668,-0.871；P0.05),但NF-K
B p65蛋白在异型增生组织和癌变组织中的表达活性都增强,而且该二病理阶段之间的指标值差异还具有统计学意义(P<0.05)；分别与此前的两个病理阶段比较,指标值差异也具有显著性意义(P0.05)；但分别与此前的两个病理阶段比较,其差异值却具有显著性意义(P0.05)；在异型增生阶段,益气解毒方组鼻咽上皮细胞凋亡活性明显高于模型组(P0.05)。而在异型增生阶段,益气解毒方组鼻咽上皮细胞的Bcl-2蛋白表达活性显著低于模型组(P0.05)。在同一病理阶段,各组鼻咽上皮细胞的Bax
selleckchem 哪里 mRNA和Bcl-2 mRNA转录活性与各自蛋白的表达活性呈现平行趋势。 在诱发性鼻咽癌变进程的单纯性增生阶段,3组大鼠鼻咽上皮细胞的NF-κB p65和IκBα蛋白表达活性均未出现显著性变化(P>0.05),但在异型增生阶段,益气解毒方组鼻咽上皮细胞的NF-κBp65蛋白表达活性显著低于模型组(P<0.05),而IκBα蛋白表达活性显著高于模型组(P
肿瘤细胞的多药耐药性(Multidrug Resistance,MDR)是肿瘤化疗失败的重要原因之一。其中,位于细胞膜上外排抗肿瘤药物蛋白的超表达是主要原因,如P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)。本论文选用了几种本研究所正在研究的新型天然产物,研究其克服人乳腺癌耐多柔比星MCF-7/DOX细胞的多药耐药性的特点,以及组蛋白乙酰化修饰对多药耐药mdr-1基因及其编码蛋白P-gp表达等方面的影响,研究克服肿瘤细胞多药耐药性的机制。 CB-839 solubility dmso 在以表观遗传修饰为靶标,抑制MDR产生基因的表达策略中,我们选择组蛋白去乙酰化酶(Histone deacetylase,HDAC)为切入点,深入研究了不同类型HDAC抑制剂如何克服以及调节多药耐药性,结果表明:Ⅲ型组蛋白去乙酰化酶SIRT1抑制剂烟酰胺(NAM)和Sirtinol对人乳腺癌MCF-7/DOX耐药细胞无交叉耐药性,通过引起细胞凋亡而起作用。通过MTT法和药物联合作用评价,我们发现:此类抑制剂不能逆转MCF-7/DOX细胞对抗肿瘤药物的多药耐药性,但是对于MCF-7敏感细胞有增加抗肿瘤药物疗效作用。进一步研究发现,无论是通过多柔比星引起的SIRT1表达增加,还是白藜芦醇所引起的SIRT1去乙酰化酶活性增加,都可以诱导MCF-7细胞表达P-gp。Ⅰ、Ⅱ型HDAC抑制剂TSA和VAS同样对MCF-7/DOX细胞无交叉耐药性,反而MCF-7/DOX细胞对TSA更加敏感。对于MCF-7细胞,VAS与紫杉醇、多柔比星合用具有协同作用,而在MCF-7/DOX细胞内无协同作用。TSA既能诱导MCF-7细胞表达P-gp,又能使MCF-7/DOX细胞P-gp表达增加。
在对康乐霉素C的研究中,我们发现康乐霉素C能抑制肿瘤细胞增殖,并诱导肿瘤细胞发生线粒体通路凋亡。康乐霉素C(1、2μg/ml)处理人肝癌HepG2细胞24小时,可观察到典型凋亡特征的DNA梯带和染色质凝集,Annexin V/PI双染色法分别观测到74.4%和94.4%细胞凋亡。在康乐霉素C诱导细胞凋亡的过程中,免疫印迹检测到P53蛋白的表达明显增加,caspase-3、-7、-9活化,PARP蛋白的切割,凋亡信号通路中的激酶P38和JNK磷酸化水平明显升高。并且康乐霉素C处理的HepG2细胞发生G_2/M期阻滞;不同浓度的康乐霉素C处理细胞4小时后,活性氧自由基明显增加,线粒体膜电位降低。同样康乐霉素C对MCF-7/DOX细胞无交叉耐药性,并诱导MCF-7/DOX细胞凋亡,但是其凋亡通路中Caspase激活明显滞后,也不涉及MAPK信号通路的改变。 在对天然产物PBC的研究中,我们发现PBC复合物和PBC-b单体增加罗丹明123在MCF-7/DOX耐药细胞和HR-20耐药细胞中的积累,并且与多柔比星合用后具有协同作用,表明PBC具有逆转多药耐药性的作用。有趣的是PBC复合物的作用要强于PBC-b单体,我们推测可能是PBC复合物中还含有逆转多药耐药性的其它成分。 总之,本论文的结果表明:1.Ⅲ型组蛋白去乙酰化酶SIRT1抑制剂对人乳腺癌MCF-7/DOX耐药细胞无交叉耐药性,通过引起细胞凋亡而起作用,此类抑制剂对于MCF-7敏感细胞有增效作用,是值得发展的新型抗肿瘤药物。2.