全自动生化分析仪测定心肌酶(乳酸脱氢酶、肌酸肌酶、谷草转氨酶)含量,Westernblot法检测细胞外信号调节激酶蛋白表达。结果红景天苷增加了缺氧/复氧损伤心肌细胞的活力,降低了心肌细胞乳酸脱氢酶和肌酸激酶的渗漏,使磷酸化细胞外信号调节激酶蛋白表达水平明显降低。结论红景天苷对缺氧诱导的心肌细胞损伤有保护作用,此作用可能通过细胞外信号调节激酶信号通路发挥作用。”
“目的:探讨急性selleck产品单核细胞白血病THP-1细胞株中核因子-κB(NF-κB)信号通路的活化状态及其抑制剂pathenolide(PN)对细胞增殖、凋亡的影响。方法:THP-1细胞置于37℃、体积分数为5%CO2培养箱中培养。①收集处于对数增殖期的细胞,采用RT-PCR方法检测THP-1细胞中P65、IκBαmRNA的表达。②用细胞裂解液分别提取THP-1的细胞质和细胞核蛋AZD2281分子重量白,采用Western Blotting法检测细胞质及细胞核中P65、IκBα蛋白的表达。③将处于对数增殖期的THP-1细胞分成10组[(空白对照孔、阴性对照孔及各实验孔(1、2、4、6、8、10、15、20μmol/LPN)],按12 h、24 h 2个检测点计算细胞增殖抑制率及增殖半数抑制浓度(IC50)的范围。④将处于对数增殖期的THP-1细胞分为JAK assay3组(空白对照、PBS对照和6μmol/L PN处理组),按第0天至第6天设计,绘制细胞增殖曲线。⑤取处于对数增殖期的THP-1细胞,分5组(分别以0、2、4、6和8μmol/L的PN处理)培养,24 h后收获细胞,分别检测细胞周期和细胞早期凋亡率。结果:①RT-PCR结果示THP-1细胞中有P65、IκBαmRNA的表达,Western blot-ting结果示细胞质中均有P65、IκBα蛋白的表达,细胞核中有P65蛋白的表达。