布鲁顿酪氨酸激酶(Btk)是非受体酪氨酸激酶家族的一员,作为Toll样受体(TLR)信号途径的组成部分,Btk信号在LPS介导的炎症反应中具有重要作用。但Btk信号在烧伤脓毒症相关肠道损伤中的作用并不清楚。本文旨在探讨Btk在LPS诱导的烫伤小鼠肠道细胞焦亡中的作用。方法将128只C57BL/6小鼠分成正常对照组、烫伤组、LPS组、A13(3mg/kg)组、A13(10mg/kg)组、A1Cell Cycle抑制剂3(30mg/kg)组。正常对照组小鼠予以37℃水浴15s进行模拟烧伤及生理盐水腹腔注射后处死;其余各组在小鼠的背部用水浴(100℃)恒温持续接触15s,计算烫伤面积10%TBSAⅢ度;随后LPS组通过腹腔注射LPS 10mg/kg,复制烧伤脓毒症模型。A13(3mg/kg)组、A13(10mg/kg)组、A13(30mg/kg)组除给予LPS外,分别给予不同浓度哪里特异性Btk抑制剂LFM-A13。除正常对照组外,各组处理完成后分别于0h、12h、24h后处死,每个时相点均为8只动物。收集小鼠血液和肠道组织分类保存。用免疫组织化学技术检测p-Btk蛋白表达情况。采用蛋白质免疫印迹技术检测小鼠肠道p-Btk、Caspase 1、Caspase 11蛋白含量。采用酶联免疫吸附测定法检测小鼠肠道和血清IL-1β含量。总体比较行单因更多素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。P<0.05为差异有统计学意义。结果(1)在12h时,与正常对照组相比,烫伤组肠道未见Btk明显活化;LPS组出现Btk活化明显增加;A13(3mg/kg)、A13(10mg/kg)、A13(30mg/kg)肠黏膜随LF M-A13浓度增加Btk活化逐步下降。(2)与正常对照组比较,LPS组在12h和24h时,p-Btk含量均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),但未在0h时观察到相同现象。