钙周期素结合蛋白/Siah-1相互作用蛋白(Calcyclin-binding-protein/Siah-1 Interactin

钙周期素结合蛋白/Siah-1相互作用蛋白(Calcyclin-binding-protein/Siah-1 Interacting Protein,CacyBP/SIP)参与多种肿瘤的发生发展,与转移预后相关,并在结肠癌细胞增殖中发挥重要作用。基因芯片筛查发现结肠癌中CacyBP/SIP与细胞周期蛋白依赖性激酶8(Cyclin-dependent kinase 8,CDK8不要)可能具有相关性。本研究通过验证结肠癌中CacyBP/SIP与CDK8的相关关系,探讨CacyBP/SIP通过CDK8的介导调控结肠癌的细胞周期,为研究结肠癌发生机制,研发治疗结肠癌的新药奠定基础。方法基因芯片筛查发现结肠癌中CacyBP/SIP与CDK8可能具有相关性,通过Oncomine数据库检索和免疫组化(Immunohistochemistr点击此处y,IHC)验证CacyBP/SIP和CDK8在正常组织和结肠癌组织中的表达情况;构建CacyBP/SIP低表达的SW480结肠癌稳转细胞株(SW480-CacyBPsh-1),通过q-PCR和Western blot分别检测SW480、SW480-NC和SW480-CacyBPsh-1细胞系中CacyBP/SIP、CDK8、β-catenin的mRPD-1/PD-L1 Inhibitor 3NA和蛋白的表达情况,并通过流式检测各组细胞的细胞周期;然后,使用PBS(对照组)和MG132(抑制E3酶降解途径)分别处理上述三种细胞,Western blot检测各组细胞内CDK8的蛋白量;最后,构建Skp2低表达的SW480细胞株(SW480-Skp2sh-2),通过q-PCR和Western blot分别检测SW480、SW480-NC和SW480-Skp2sh-2细胞系中Skp2、CDK8的mRNA和蛋白的表达情况。

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