因此,应用该方法可以有效地创建突变体库,促进酶的定向进化技术的快速发展。
土壤微生物总DNA经试剂盒提取,使用CODEHOP引物进行木聚糖酶基因编码区核心序列进行扩增,根据所扩增序列设计hiTAIL-PCR特异性引物,最终克隆了1个编码区长度为1 284 bp的新颖木聚糖酶基因。生物信息学分析表明,该基因编码蛋白质氨基酸序列长度为427 aa,分ON-01910 IC50子量为47 398.91 Da,理论等电点(pI)为8.99,是一个不含跨膜区域的亲水性蛋白。
目的为了探究药厂工作环境中是否存在病原微生物污染。方法采集药厂工作环境可能存在的细菌样本,进行增菌培养后观察细菌菌落特征和显微镜下革兰染色特征。用水煮法提取分离出细菌的DNA,采用16SrRNA通用引物扩增出DNA片段,纯化PMLN4924体内CR产物,统一送去华大基因公司测序,并进行拼接和校对DNA序列。在NCBI官方网站进行基因序列BLAST,鉴定细菌类别。结果 6个样品经分离培养后被鉴定为弯曲芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、短小芽胞杆菌、藤黄微球菌、科氏葡萄球菌、尿芽胞八叠球菌。结论该药厂工作环境中存在一定的病原微生物污染,应注意严格执行相应管理制度和卫生标准,保持工作环境时间符合无菌标准。
通过设计不同富含G碱基的DNA序列,探究了G碱基对核酸-铜/银纳米簇(DNA-Cu/AgNCs)的荧光增强效应,并建立了铜离子的荧光检测方法。结果发现,在富含C碱基序列模板的5′端增加G5序列后,制备得到的铜/银纳米簇的荧光强度显著增强。同时,该DNA-Cu/AgNCs的荧光可被Cu~(2+)和Hg~(2+)猝灭。通过NaBH_4掩蔽Hg~(2+)实现了对Cu~(2+)的特异性检测。