Ang-(1-7)能有效抑制AngⅡ对VSMCs增殖和迁移的促进作用。 2.AngⅡ能有效激活ERK1／2、P38、JNK1／2,抑制SM22α表达。Ang-(1-7)能够下调AngⅡ引起的ERK1／2、P38激活,增加SM22α表达,A779可大部分逆转Ang-(1-7)的作用。Ang-(1-7)对JNK1／2的激活无显著作用。 3. Ang-(1-7)-MAS-ERK/P38-SM22α可能是影响VSMCs生物活性的主要信号通路。 1.背景 动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是导致心脑血管疾病的病理学基础。肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system, RAS)在血管平滑肌细胞(vascular somooth muscle cells,VSMCs)增殖、迁移及AS斑块形成和进展过程中起着重要的作用。血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,

或者 AngⅡ)是RAS系统的主要活性成分。大量的研究证实,AngⅡ可显著促进VSMCs的增殖和迁移活性,促进AS形成和进展。 血管紧张素-(1-7)[Angiotensin-(1-7), Ang-(1-7)]是近年来发现的RAS家族新成员,在体内主要由血管紧张素转化酶-2(angiotensin converting enzyme-2,ACE2)分解AngⅡ所产生。近年研究发现,Ang-(1-7)是AngⅡ重要的内源性拮抗剂,具有抑制炎症和氧化应激、激活磷酸酯酶、促进肾脏排钠、促进血管舒张等作用,介导了心肌重构和纤维化、高血压血管重构、血管平滑肌细胞增殖、炎症、血管内皮细胞功能调节等多个病理生理过程。 以往研究发现,Ang-(1-7)可抑制球囊内皮损伤模型中主动脉VSMCs增殖和迁移以及血管内膜增厚。本实验室的研究也发现,ACE2过表达可抑制早期AS病变的形成。这些研究提示,Ang-(1-7)在AS的进程中可能发挥着重要的保护作用。因此,通过直接应用Ang-(1-7),拮抗体内AS进程中过度激活的AngⅡ,对AS病变得预防和治疗可能起到有益的作用。然而,Ang-(1-7)对于AS病变形成的量效关系至今不明。此外,我们的体外研究证实,Ang-(1-7)可调节VSMCs的ERK1／2、P38、SM22α等信号蛋白的表达,抑制VSMCs的增殖和迁移,但这些体外实验的结果能否在体内得到验证尚不明了。

Idelalisib 因此,本研究提出如下假设：在ApoE-／-小鼠AS病变模型中,Ang-(1-7)可通过调节体内MAS-ERK/P38-SM22α信号转导通路,抑制VSMCs增殖和迁移,进而抑制AS的发展。 2.目的 2.1在体内试验中,观察不同剂量的Ang-(1-7)对ApoE-／-小鼠AS病变的抑制作用； 2.2在体内实验中,验证Ang-(1-7)抑制ApoE-／-小鼠AS病变形成的机制。 3.方法 3.1 ApoE-／-小鼠AS模型的建立 8周龄的雄性ApoE-／-小鼠实验全程高脂饮食(含0.25%胆固醇和15%脂肪)喂养8周。 获悉更多 3.2 Ang-(1-7)体内干预实验 高脂喂养4周后,随机分为PBS对照组(12只)、Ang-(1-7)干预组(36只)和A779干预组(36只)。Ang-(1-7)和A779组又分别分为3个剂量组(100ng／kg.min、200ng／kg.min、400ng／kg.min)。用药具体方法为：经植入式胶囊渗透压泵皮下持续泵入,用药28天。 分别于药物干预4周后处死动物,进行斑块的病理学和免疫组织化学检测。 3.3血液生化指标检测 分别检测血清甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的水平。 3.4组织病理学检测 将主动脉纵剖后行大体油红O染色,对主动脉根部斑块进行H&E染色,心肌组织进行Masson染色；并通过免疫组织化学方法检测主动脉SM22α和肾脏内MOMA-2的表达。 3.5 Western blot检测 取新鲜主动脉根部组织,提取蛋白质,Western blot检测AS病变组织p-ERK1／2和p-P38的表达。 4.结果 4.1血液生化指标检测： 对照组、Ang-(1-7)各亚组和A779各亚组血清TC、TG、HDL-C、LDL-C未见统计学差异。 4.2 Ang-(1-7)的抗AS作用 大体油红O染色显示,与对照组相比,各Ang-(1-7)干预组均能有效抑制主动脉表面AS病灶范围。Ang-(1-7)抑制主动脉表面AS病变的作用呈剂量依赖性；随Ang-(1-7)浓度的增加,主动脉表面AS病灶范围逐渐减少。Ang-(1-7)最大剂量组与对照组主动脉表面AS病灶范围有显著统计学差异(2.58% vs.4.14%,P<0.05)和主动脉根部(23.22%vs.20.28%,P0.05),但均显著低于对照组(P值均0.