tM的SB431542,RA组的DMEM完全培养基中含RA浓度分别为0.05、0.10、0.20、0.40 nM。分化培养4 d后观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志物CDl05和干细胞抗原1(Sca-1)的表达,以CD105+细胞和Sca-1-细胞的比例确定iPS和ES向MSC分化的程度。结果：1)小鼠ES和iPS在ESGRO-2i培养基里生长较好。ES分化4 MDV3100核磁共振 d后,对照组和SB431542组ES和iPS分化成内皮样细胞,在含有不同浓度RA的培养基中ES和iPS可有效分化为纤维状细胞；2)ES分化4

d后,SB431542组Sca-1+细胞比例显著高于对照组(P0.05)。在RA浓度为0.05、0.10、0.20、0.40 nM组中,ES分化的CD105+细胞比例显著高于对照组和SB431542组(P<0.05),Sca-1+细胞比例显著高于对照组(P<0.05),但与SB431542组比较显著降低(P<0.05),Sca-1+细胞比例显著高于对照组(P<0.05),但与SB431542组比较均显著降低(P0.05)。结论：利用RA可以促进多能干细胞向MSC样细胞分化,分化方法较为简单,分化周期较短,为多能干细胞向MSC样细胞的分化提供了一定的方法基础。背景：结节硬化复合物1(Tscl)和结节硬化复合物2(Tsc2)结合形成一个复合物,这个复合物可以通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白1(mTORC1)来调节细胞代谢和能量的稳定,TSC1和TSC2功能的丢失可引起mTORC1活性的升高,进而引起细胞体积增大、增殖能力增强。有研究称Tscl调节巨噬细胞M1/M2的极化,但对于Tscl对巨噬细胞的功能和自稳的精确调控作用尚不明确,本研究我们揭示Tscl对于调节巨噬细胞的生存、生长、迁移和吞噬功能具有十分重要的作用。材料与方法：我们将由Lysozyme启动子控制表达Cre重组酶的LysMCre鼠与Tsc1flox/flox鼠交配获得髓系细胞特异性的Tscl条件性敲除鼠(LysMCreTsc1flox/flox);PCR鉴定鼠的基因型,western blot鉴定鼠巨噬细胞Tscl蛋白的敲除情况；巨噬细胞的凋亡和生长由流式细胞术、RT-PCR进行检测；巨噬细胞精氨酸酶活化由QuantiChromTM arginase assay kit进行检测；M1和M2相关的基因的mRNA的表达由RT-PCT进行检测；巨噬细胞对T细胞活化的功能通过CD4+T细胞和巨噬细胞体外共培养3天后CD4+T细胞的活化进行鉴定；巨噬细胞的吞噬功能由VybrantTM

BTK pathway inhibitor phagocytosis assay试剂盒进行检测；巨噬细胞的迁移由Transwell实验进行检测；脾脏细胞和淋巴结细胞Foxp3的染色是通过Treg检测试剂盒进行。结果：Tsc1 KO鼠巨噬细胞凋亡增加、细胞变大,腹腔注射Rapa可部分抑制Tscl缺陷引起的巨噬细胞的凋亡和细胞生长；在稳定和炎症状态下,Tscl缺陷的巨噬细胞在稳定和诱导作用下M1和M2特性均较WT巨噬细胞高,抑制mTORC1部分逆转了Tscl缺陷引起的巨噬细胞的M2和M1的变化；Tscl缺陷的巨噬细胞CCR2和CCR5趋化受体表达降低、迁移能力下降、趋化因子升高,抑制mTORC1部分逆转了Tscl缺陷引起的巨噬细胞的趋化因子和趋化受体的变化；另外,Tscl缺陷的巨噬细胞的吞噬能力和产生活性氧(ROS)的能力增加；与Tsc1缺陷的巨噬细胞共培养的CD4+T细胞的增殖和活化功能减弱。结论：1)Tscl促进巨噬细胞的生存、抑制巨噬细胞的凋亡,并且这两种作用是与]mTORC1的活性有关。CD71和CD98可能参与了Tsc1调节的巨噬细胞的生长；2)Tsc1促进巨噬细胞M1和M2的特性,Tsc1缺陷的巨噬细胞在稳定状态下,分别增高了M1和M2的特性。在LPS和IL-4刺激下,Tsc1缺陷的巨噬细胞分布增高了M1和M2的极化特性；3)Tsc1促进巨噬细胞的迁移,Tscl缺陷的巨噬细胞的CCR2和CCR5的趋化受体表达降低,CCL2趋化引起的迁移能力降低。另外,Tsc1缺陷的巨噬细胞趋化因子表达升高。Tscl抑制巨噬细胞的吞噬和ROS的产生,促进CD4+T细胞的活化；4)

Tscl KO鼠引起自发的淋巴组织增生性的疾病。脾脏和淋巴结增大,CD4+T细胞和CD8+T细胞活化严重。另外,鼠的体重没有明显的变化。
目的意义:放射性肺纤维化是临床胸部肿瘤放疗常见的并发症之一,也可发生于骨髓移植手术前的放疗预处理及其它意外照射,其主要特征为肺脏内纤维结缔组织增多,实质细胞减少,持续进展可致肺脏结构破坏和功能减退,乃至肺功能衰竭,严重威胁人类健康和生命。临床上放射性肺纤维化缺乏特异、有效的治疗措施,患者预后较差。因此研究并阐明放射性肺纤维化发生的规律与特征和分子机制,对于临床上预测放射性肺纤维化的发生和转归,寻找干预、治疗的手段有着极其重要的意义。研究表明,转化生长因子β-1(transforming selleck产品 growth factor-β,TGF-β1)是重要的促纤维化因子之一,在肺纤维化过程中调控成纤维细胞分裂、增殖及细胞外基质的沉积,促进纤维化的发生。然而TGF-β3在组织损伤修复中表现出了不同于TGF-β1的抗纤维化特性,但是目前缺少TGF-β3用于放射性肺纤维化干预措施的依据。本研究以雌性C57BL/6小鼠为实验对象,建立放射性肺纤维化模型,观察TGF-β3对小鼠放射性肺纤维化的影响,寻找TGF-β3在放射性肺纤维化中可能的调控机制,为临床放射性肺纤维化的预防和治疗提供新的线索。材料与方法:雌性C57BL/6小鼠(6-8周,20±2g)麻醉后固定于自制的照射板上,除胸部外其余部分用10cm铅砖防护,采用60Coγ-射线单次胸部照射,照射剂量为20Gy,照射源距3m,剂量率215c Gy/min。在照后4h照射组给予腹腔注射0.5ml生理盐水,TGF-β3组给予0.